“‘以子之矛,攻子之盾’是戰(zhàn)國時期的一個典故,沒想到在昆蟲界也存在這種現(xiàn)象?!?/p>
中國農(nóng)業(yè)科學院蔬菜花卉研究所(以下簡稱蔬菜所)研究員張友軍告訴《中國科學報》,他們經(jīng)過20年的研究,終于證明煙粉虱在進化過程中“竊取”了宿主植物的基因用以“解毒”。
這一項“獨門絕技”使得煙粉虱能夠取食600多種植物,為害全球農(nóng)作物。它被聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織認定為世界第二大害蟲,也是至今為止唯一被冠以“超級害蟲”的農(nóng)業(yè)害蟲,被列為最危險的100種入侵物種。
3月25日,《細胞》在線發(fā)表了這一中外科學家團隊的合作成果。
4月1日,《細胞》將以封面文章形式正式出版這一成果論文。
這將為新一代靶標基因?qū)虻臒煼凼镩g精準綠色防控技術(shù)的研發(fā)提供全新思路。
煙粉虱 中國農(nóng)業(yè)科學院蔬菜花卉研究所供圖
“食性”之謎
1996年,北京的蔬菜大棚里發(fā)現(xiàn)了一種長得很像溫室白粉虱的害蟲。
它能夠取食后者吃不了的葉菜,甚至更多種類的農(nóng)作物,但科學家之前用來消滅溫室白粉虱的策略對其完全不起作用。
這就是入侵我國的害蟲煙粉虱。
“從那時候開始,昆蟲的食性之謎就成為我心中一個揮之不去的問題。”論文主要通訊作者張友軍回憶說。
有的昆蟲只取食一種植物,如褐飛虱只吃水稻,屬于單食性;有的能吃一科內(nèi)或近緣科的多種植物,如小菜蛾只取食十字花科蔬菜作物,叫做寡食性;還有的能吃多種不同科的植物,如煙粉虱等,叫做多食性昆蟲。
為什么昆蟲吃的植物不一樣?
多食性害蟲適應能力強,如何防治?食性顯然與害蟲的種群暴發(fā)危害密切相關(guān)。
1999年,張友軍開始帶領(lǐng)團隊探索昆蟲的食性之謎。
論文共同第一作者夏吉星告訴《中國科學報》,昆蟲取食寄主植物后,會誘導寄主植物產(chǎn)生防御反應,并生成大量對昆蟲而言有毒的次生代謝物,導致大部分昆蟲死亡。
次生代謝產(chǎn)物是植物抵御害蟲為害的重要武器,就好像一面“盾牌”。
而昆蟲為了存活下去必須對抗植物的次生代謝物,這樣才能隨心所欲地取食。
“煙粉虱能吃600多種植物,說明它能抵抗大多數(shù)植物的次生代謝物?!睆堄衍娬J為,煙粉虱是一個重要而關(guān)鍵的研究對象。
煙粉虱不僅通過刺吸寄主植物韌皮部汁液對其造成直接傷害,而且能分泌蜜露誘發(fā)煤污病等植物真菌病害為害植物,更重要的是,煙粉虱能夠傳播300余種植物病毒,每年造成數(shù)十億美元的經(jīng)濟損失。
2001年起,該團隊將研究力量集中在了煙粉虱的寄主適應性及其暴發(fā)成災的機制上。
通過對全國范圍內(nèi)260多個田間種群共6000余個樣本的檢測,以及對種群間等位基因頻率、分化系數(shù)和基因流的研究,他們闡明了煙粉虱在我國的入侵分布現(xiàn)狀、入侵種群來源、擴散路徑和入侵特點。
通過生物學、生態(tài)學與分子生物學方法,他們明確了入侵煙粉虱種群擴散、暴發(fā)與其獨特的生物學特性、對高溫和變溫更強的適應能力、更強的寄主適應性有關(guān)。
“這些工作為我們后來解析煙粉虱對酚糖解毒的分子機理奠定了基礎(chǔ)。”張友軍說。
竊取植物之“矛”
友軍團隊從植物的次生代謝物入手,分析了煙粉虱喜愛的食物之一番茄葉片的代謝譜,檢測到9873種化合物,其中鑒定出290種酚糖,占2.93%。
酚糖是一類重要的植物抗蟲次生代謝產(chǎn)物,能抑制昆蟲生長發(fā)育。
奇妙的是,植物自己分泌的酚糖對植物本身也有害處。
“過多的酚糖對植物生長發(fā)育不利?!闭撐墓餐谝蛔髡?、蔬菜所研究員郭兆將說。
因此,當害蟲離去后,植物要快速降解掉多余的酚糖。
植物給自己準備的“解藥”就是酚糖丙二酰基轉(zhuǎn)移酶(PMaT)。
由它催化的酚糖丙二?;磻谥参锏纳^程中發(fā)揮重要的“解毒”作用。
那么,喜歡吃番茄葉片的煙粉虱到底是怎么對付酚糖的?
以往的化學分析已經(jīng)不能解答這個難題。
一段時間里,煙粉虱的解毒機制研究進展緩慢。
2009年,Q型煙粉虱在國內(nèi)大面積暴發(fā),并在番茄上傳播病毒,造成的經(jīng)濟損失達100多億元。
對煙粉虱的防控刻不容緩。
就在這時,基因組測序技術(shù)的進步帶來了突破瓶頸的希望。
張友軍團隊決定給Q型煙粉虱基因組測序。
2013年,煙粉虱基因組測序完成,獲得了20786個基因。
論文共同第一作者楊澤眾告訴《中國科學報》,在分析煙粉虱復雜的高級功能和生物系統(tǒng)相關(guān)基因的過程中,“我們發(fā)現(xiàn)了后來被命名為BtPMaT1的基因。當時感覺很興奮”。
因為他們隨后證明,這個煙粉虱的基因與植物的酚糖丙二?;D(zhuǎn)移酶是同源基因。
“BtPMaT1基因的確存在于煙粉虱基因組中,而非植物基因組污染?!睆堄衍娬f,進化樹分析結(jié)果表明,煙粉虱BtPMaT1基因的同源基因僅存在于植物和少量的真菌中。
“這是煙粉虱從植物那里‘偷盜’而來的基因,這是一種普遍存在于生物界的水平基因轉(zhuǎn)移現(xiàn)象?!睆堄衍娬f。
此前研究已經(jīng)證明,水平基因轉(zhuǎn)移在原核生物之間經(jīng)常發(fā)生,通常認為是原核生物進化的驅(qū)動力。
越來越多的證據(jù)表明,水平基因轉(zhuǎn)移也是真核生物適應性進化的重要因素。
不過,節(jié)肢動物水平基因轉(zhuǎn)移事件的基因供體幾乎全是微生物,此前一直缺少植物源功能基因水平轉(zhuǎn)移至昆蟲的實驗證據(jù)。
論文共同通訊作者、瑞士納沙泰爾大學化學生態(tài)學家和昆蟲學家Ted Turlings說:“這項研究在國際上首次提供了植物基因水平轉(zhuǎn)移至昆蟲中的功能性證據(jù),這種能夠代謝植物防御性毒素的基因——BtPMaT1僅存在于煙粉虱中?!?/p>
通過體外細胞表達酶活分析、煙粉虱中腸組織酶活分析和煙粉虱排泄物酶活代謝分析發(fā)現(xiàn),這個基因依然行使著和植物同源基因一樣的功能——對酚糖進行解毒。
“植物的‘矛’被煙粉虱偷來,反而變成了攻擊植物的‘矛’?!睆堄衍娬f。
用RNA干擾反制
“我們認為植物的某種病毒可能攜帶了BtPMaT1基因,在被煙粉虱取食后,該病毒通過某種未知的機制,將該基因整合到煙粉虱的基因組中?!?/p>
Turlings說,“當然,這是一件看似不可能發(fā)生的事情,但試想在幾百萬年里,幾十億個昆蟲、病毒和植物穿越時間不斷進化,這種情況偶爾也會發(fā)生,如果獲得的基因?qū)ハx有利,那么它就會進化得更有利,并廣泛傳播。”
揭示了煙粉虱難以置信的適應能力的分子機制之后,張友軍團隊制定了一種策略,來破解煙粉虱竊取的“超級力量”,即利用RNA干擾煙粉虱的BtPMaT1基因,使其對這種植物有毒化合物敏感。
RNA干擾是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA誘發(fā)的、同源mRNA高效特異性降解的現(xiàn)象,其作用是使得相關(guān)基因沉默。
在這里,“我們用BtPMaT1基因的片段制作了發(fā)夾RNA,直接向煙粉虱飼喂發(fā)夾RNA,干擾效率約為50%,沉默該基因后,3種酚糖處理使煙粉虱的死亡率增加約20%?!睆堄衍娬f。
此外,他們還構(gòu)建了表達該發(fā)夾RNA的轉(zhuǎn)基因番茄品系。
他們發(fā)現(xiàn),取食轉(zhuǎn)基因番茄的煙粉虱排泄物中,一部分酚糖類物質(zhì)的含量增加,且部分酚糖的酰基化產(chǎn)物降低。
“在沒有農(nóng)藥作用下,取食野生番茄7天后,煙粉虱死亡率為15.48%,取食轉(zhuǎn)基因番茄7天后煙粉虱死亡率為93.35%,而對非靶標節(jié)肢動物蚜蟲和二斑葉螨沒有影響?!惫讓⒄f,轉(zhuǎn)基因番茄品系能夠有效控制煙粉虱。
“當然,應用這種方法還需要克服一些障礙,最明顯的就是人們對轉(zhuǎn)基因作物的憂慮?!?/p>
Turlings說,“但在未來,我確實認為這是一種綠色高效安全的煙粉虱防治方法,因為該基因來源于植物,而且,現(xiàn)在我們明確了它的作用機制,我們也有能力應對煙粉虱基因可能發(fā)生的變化?!?/p>
“這種轉(zhuǎn)基因番茄轉(zhuǎn)入的基因是植物的同源基因,因此更加綠色高效。未來有可能應用到煙粉虱防治過程中?!?/p>
張友軍說,他們已經(jīng)申請了中國國家發(fā)明專利。
相關(guān)論文信息:
https://doi.org/10.1016/j.cell.2021.02.014
《中國科學報》 (2021-03-26 第1版 要聞 原標題為《20年!破解超級害蟲“獨門絕技”》)
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